一文告訴您微生物限度檢測的3種方法及每種方法的特點

根據藥典要求，除注射劑和輸液劑進行無菌檢查外，其他非規定滅菌制劑及其原輔料都要進行一定限度的微生物檢查，同時規定不得有控制菌的存在。非無菌產品（制劑）上市銷售前，需在食品藥品監督管理局備案，并提供三個不同批次的產品微生物限度檢查及方法學適用性試驗報告。
微生物限度檢查法是檢查非規定滅菌制劑及其原料、輔料受微生物污染程度的方法。檢查項目包括細菌數、霉菌數、酵母菌數及控制菌檢查。檢查應在環境潔凈度10000 級下的局部潔凈度100 級的單向流空氣區域內進行。檢驗全過程必須嚴格遵守無菌操作，防止再污染。單向流空氣區域、工作臺面及環境應定期按《醫藥工業潔凈室（區）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現行國家標準進行潔凈度驗證。
微生物限度檢測方法主要包括3種：
1.微生物計數法：該種檢測方法用于能在有氧條件下生長的嗜溫細菌和真菌的計數。本法用于檢查非無菌制劑及其原、輔料等是否符合相應的微生物限度標準。檢驗項目分別為：需氧菌、霉菌及酵母菌計數。其中，需氧菌計數方法適用性試驗菌種：銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌。霉菌及酵母菌計數方法適用性試驗菌種：白色念珠菌、黑曲霉。
2.控制菌檢查法：控制菌檢查法系用于在規定的試驗條件下，檢査供試品中是否存在特定的微生物。分別為培養基適用性檢查和控菌檢查方法適用性試驗。控制菌計數方法適用性試驗菌種：耐膽鹽革蘭陰性菌、大腸埃希氏菌、沙門氏菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄菌、梭菌、白色念珠菌。
3.方法學適用性試驗：藥品的微生物計數方法應進行方法適用性試驗，以確認所采用的方法適合于該產品的微生物計數。
微生物限度檢測法及其方法驗證的主要特點，在于檢驗對象本身的特殊性。具體特殊性表現為：
1.能繁殖的活細胞生物。該活細胞處于不穩定狀態,可隨存放時間延長而亡,也可在適宜條件下大量繁殖。而檢測條件的狀況不一可使其生長情況各異,因而常出現同批樣品在不同條件下檢測,有不同的結果。但在保存條件相對穩定時,微生物在一定時間內處于動態平衡,在標準化的條件下操作結果仍可予與正確評估。
2.不確定性。藥品受微生物的污染,其種類可以多樣,污染情況依生產、設備、原料、管理、劑型等條件而定,非藥品本身固有。被污染批次中的不合格品是一個隨機變量。
3.分布的不均勻性。這種不均勻性源于污染源的復雜性,如原輔料污染,工藝污染,空間污染和操作人員污染。再者,微生物具有簇團性,簇團大小,緊密程度是可遺傳的,簇團的分散性差異較大,該特點無疑強化了不均勻性。
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