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弗氏不完全佐劑-蘇州博特龍(圖)

免0疫佐劑簡稱佐劑,即非特異性免0疫增0生劑,弗氏不完全佐劑,指那 些同*原一起或預(yù)先注入機(jī)體內(nèi)能增強(qiáng)機(jī)體 對*原的免0疫應(yīng)答能力或改變免0疫應(yīng)答類型 的輔助物質(zhì)。佐劑可以具有免0疫原性,也可無免0疫原性。佐劑種類很多,目前尚無統(tǒng)一 的分類方法,應(yīng)用*多的是弗氏佐劑和細(xì)胞0因子佐劑。佐劑的免0疫生物學(xué)作用是增強(qiáng)免0疫原性、增強(qiáng)*0體的滴度、改變*0體產(chǎn)生的類型、引起或增強(qiáng)遲發(fā)超敏反應(yīng),但佐劑的 作用機(jī)制尚未完全明了,不同佐劑作用的機(jī) 制也不盡相同。
雜交瘤細(xì)胞的篩選與克0隆
細(xì)胞融合后,培養(yǎng)于添加了 hat 的選擇培養(yǎng)基的 96 孔板中,培養(yǎng)一天后半定量換液,培養(yǎng)基更換時應(yīng)注意輕緩,第 5 天能在顯微鏡下看到明顯的雜交瘤細(xì)胞克0隆,第 7 天左右,雜交瘤細(xì)胞能長至鋪滿孔底約 1 /10。此時進(jìn)行 elisa 檢測養(yǎng)心細(xì)胞孔。取細(xì)胞培養(yǎng)上清對 mrj 融合蛋白進(jìn)行間接 elisa檢測,篩選出能分泌*0體的雜交瘤細(xì)胞孔,有限稀釋法對陽性孔進(jìn)行亞克0隆,經(jīng)過 3 次亞克0隆后,獲得了能夠穩(wěn)定 分 泌 * mrj 融合蛋白單克0隆*0體的細(xì)胞株。對雜交瘤細(xì)胞株按從 96 孔板-24 孔板-10 cm 培養(yǎng)皿的順序擴(kuò)大培養(yǎng),部分細(xì)胞用于腹0水制備單*,部分細(xì)胞凍存?zhèn)溆谩?br>quickantibody系列免0疫佐劑有哪些特點(diǎn)?
與常規(guī)使用的弗氏佐劑相比,quickantibody免0疫佐劑具有免0疫周期短、針次少、無需乳化、*原用量低、*0體滴度高、*0體親合力高、易獲得構(gòu)象型表位的*0體等多方面優(yōu)點(diǎn),詳述如下:
1. quickantibody只需兩針免0疫,無論是用于單克0隆還是多克0隆*0體制備,與弗氏佐劑相比可減少免0疫針次。
2. quickantibody通過減少免0疫針次和降低每針次*原用量,從而可大大節(jié)省總*原用量。推薦使用的*原用量為(1)免0疫原性較弱的亞單位蛋白*原每針次5-50μg(通常為小鼠5-20μg,
兔子20-50μg);(2)免0疫原性較強(qiáng)的滅活全病毒或全*以及病毒樣顆粒*原每針次1-10μg(通常為小鼠1-5μg ,兔子5-10μg)。
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